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色譜常見(jiàn)使用問(wèn)題的詳細解答

更新時(shí)間:2016-03-09      點(diǎn)擊次數:3406

問(wèn):用HPLC進(jìn)行分析時(shí)保留時(shí)間有時(shí)發(fā)生漂移,有時(shí)發(fā)生快速變化,原因何在?如何解決?
  ( 答:關(guān)于漂移問(wèn)題:
  1、溫度控制不好,解決方法是采用恒溫裝置,保持柱溫恒定
  2、流動(dòng)相發(fā)生變化,解決辦法是防止流動(dòng)相發(fā)生蒸發(fā)、反應等
  3、柱子未平衡好,需對柱子進(jìn)行更長(cháng)時(shí)間的平衡
  關(guān)于快速變化問(wèn)題
  1、流速發(fā)生變化,解決辦法是重新設定流速,使之保持穩定
  2、泵中有氣泡,可通過(guò)排氣等操作將氣泡趕出。
  3、流動(dòng)相不合適,解決辦法為改換流動(dòng)相或使流動(dòng)相在控制室內進(jìn)行適當混合
  問(wèn):色質(zhì)聯(lián)用中毛細柱的選擇應注意什么問(wèn)題?
  答:1、柱效要高
  2、熱穩定性好
  化學(xué)惰性強
  具體選擇應注意
  1、柱極性。根據分析樣品選擇不同極性的柱子進(jìn)行分析
  2、柱子內徑。內徑大小決定柱容量
  3、液膜厚度。分析樣品溫度一不一樣,對膜厚有不同要求,溫度高液膜要厚,溫度低液膜要薄
  4、柱長(cháng)度。柱越長(cháng),柱效越高,分離效果越好,但也存在吸附問(wèn)題,柱子過(guò)長(cháng),分析時(shí)間長(cháng),因此要根據樣品考慮柱子長(cháng)度
  5、外涂層(柱體)的選擇
  6、另外還有儀器型號、分析對象等因素
  問(wèn):液相色譜中峰出現拖尾或出現雙峰的原因是什么?
  答:1、篩板堵塞或柱失效,解決辦法是反向沖洗柱子,替換篩板或更換柱子。
  2、存在干擾峰,解決辦法為使用較長(cháng)的柱子,改換流動(dòng)相或更換選擇性好的柱子
  ( 問(wèn):從那些方面可以簡(jiǎn)單判別毛細管柱子的熱穩定性好壞?
  答:1、分配容量(或容量因子)K,好的柱子在高溫運行后,分配容量K不應有明顯的下降,否則,說(shuō)明柱子的熱穩定性不好。
  2、理論塔板數n,熱穩定性好的柱子經(jīng)受高溫后,理論塔板數應基本保持恒定
  3、柱子的極性。熱穩定性好的柱子,高溫前后極性變化不大,具體表現為保留指數I值沒(méi)有大的變化。
  4、噪聲。熱穩定性好的柱子在高溫下使用后,噪聲不能增加.
  5、柱子的去活層,毛細管柱子涂固定液前內部一般要用去活性試劑去活以增加惰性。質(zhì)量好的毛細管柱子高溫后,去活層
  不應該變化,表現在對強極性樣品或酸堿性樣品的吸附性不能增加。

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